目的：设计并筛选能高效抑制创伤性关节炎滑膜细胞肿瘤坏死因子α（T N F‐α）表达的最佳干扰序列，为进一步研究TNF‐α基因对创伤性关节炎的临床应用奠定基础。方法根据人源 TNF‐α mRNA 的序列，设计合成3组不同的且能干扰 TNF‐α基因表达的小型干扰 RNA（siRNA）序列，将其转染人创伤性关节炎滑膜细胞，与阴性对照组（NC 组）比较。培养48 h 后，采用实时灾光定量 PCR（RT‐PCR）检测滑膜细胞 TNF‐α mRNA 表达水平，采用 ELISA 法检测细胞上清液 TNF‐α表达水平。结果与 NC 组相比，3组 siRNA 中有2组 siRNA 可有效使人滑膜细胞中 TNF‐α mRNA 表达减少（P＜0．01）；同时细胞上清液中 TNF‐α分泌量下降，与 NC 组比较差异有统计学意义（P＜0．01）。结论成功设计合成了特异且高效阻断 TNF‐α表达的 siRNA 。
作者：沈孝龙；廖琦；郝亮
来源：重庆医学 2014 年 31期
