目的：研究腺相关病毒‐肝细胞生长因子K1（AAV‐HGFK1）对KRAS、BRAF野生型和突变型大肠癌细胞株的生长影响。方法选择人源的细胞株 KRAS和BRAF野生的SW48，KRAS突变的 Lovo ，KRAS突变且不表达表皮生长因子受体（EGFR）的SW620，BRAF突变的HT29，实时荧光定量PCR（RT‐PCR）测定EGFR基因转录水平，分别用5×104 vg/细胞的腺相关病毒（AAV）感染以上细胞株，荧光显微镜和流式细胞仪测定AAV‐EGFP感染率。加入或不加表皮生长因子（EGF）的情况下，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测EGFR、磷酸化EGFR（p‐EGFR）和β‐actin ，四甲基偶氮唑盐比色（MTT）法测细胞增殖。结果Lovo和 HT29高表达EGFR ，而SW48表达EGFR较低，加入EGF促进了以上3种细胞的 EGFR磷酸化，AAV‐HGFK1抑制EGFR磷酸化，从而显著降低其增殖。EGF对SW620增殖无显著影响，但AAV‐HGFK1感染抑制了胎牛血清培养的SW620细胞。结论 AAV‐HGFK1可能直接作用于EGFR ，抑制其磷酸化从而阻断EGF促进细胞增殖，并可能通过其他通路对KRAS或BRA F基因野生或突变的大肠癌细胞都有抑制作用。
作者：邓飞鸿；聂飚；左俊华；柳雪花；陈金敏
来源：重庆医学 2014 年 33期
