目的：研究RNA干扰（RNAi）人肺癌A549细胞中期因子（MK）基因表达及对肿瘤细胞凋亡的影响。方法构建含MK siRNA真核表达载体，将其转染到人肺癌A549细胞株中（实验组），另有阴性对照组（转染阴性对照质粒）和空白对照组。应用RT‐PCR的方法检测各组细胞中MK mRNA的表达情况；采用Western blot法检测MK蛋白的表达情况；用流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果实验组MK蛋白和mRNA表达都下降，分别下降了89．3％和83．3％。转染实验组A549细胞有自发性凋亡的发生，早期凋亡比阴性对照组和空白组分别提高了15．5倍和9．34倍。实验组caspase‐3活性明显高于阴性对照组和空白对照组（P＜0．05）。结论 RNAi下调人肺癌A549细胞株MK的表达，可诱导肿瘤细胞的自身凋亡。
作者：孙常铭；王丽萍；刘敏；赵维川；朴宗方；张秀琴
来源：重庆医学 2015 年 5期
