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目的:利用 C57BL /6小鼠探索出一种改良的小鼠滑膜成纤维细胞(SF)的原代培养方法,以方便类风湿关节炎(RA)关于滑膜炎的研究。方法收集小鼠髋关节周围滑膜,去除内含的“蛋黄样”物,将滑膜移入含0.5%Ⅳ型胶原酶的 EP 管中,剪碎;置入37℃摇箱中振荡消化60 min ,然后在涡轮振荡仪上振荡1.5 min ,常规培养。结果细胞培养1周左右。进行第一次传代;大约在培养10 d 后滑膜巨噬细胞的数量达到最高峰,然后逐渐减少;在第3次传代(15~20 d)后,滑膜巨噬细胞基本消失。用 Vimentin 标记的细胞免疫荧光化学染色显示 SF 细胞纯度超过95%;用 Vimentin 和 CD90.2标记的流式细胞术显示其纯度达到95%,用 CD54标记其纯度大约为80%。结论利用 C57BL/6小鼠探索出一种改良的小鼠 SF 的原代培养方法是一种简便易行的小鼠 SF 的原代培养方法。

作者:赵进军;胡子有;欧阳晴晴;毋静;陈玉姣;杨敏

来源:重庆医学 2016 年 2期

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作者:
赵进军;胡子有;欧阳晴晴;毋静;陈玉姣;杨敏
来源:
重庆医学 2016 年 2期
标签:
关节炎 ,类风湿 成纤维细胞 滑膜 细胞培养技术 小鼠 ,近交 C57BL arthritis,rheumatoid fibroblasts synovial membrane cell culture techniques mice,inbred C57BL
目的:利用 C57BL /6小鼠探索出一种改良的小鼠滑膜成纤维细胞(SF)的原代培养方法,以方便类风湿关节炎(RA)关于滑膜炎的研究。方法收集小鼠髋关节周围滑膜,去除内含的“蛋黄样”物,将滑膜移入含0.5%Ⅳ型胶原酶的 EP 管中,剪碎;置入37℃摇箱中振荡消化60 min ,然后在涡轮振荡仪上振荡1.5 min ,常规培养。结果细胞培养1周左右。进行第一次传代;大约在培养10 d 后滑膜巨噬细胞的数量达到最高峰,然后逐渐减少;在第3次传代(15~20 d)后,滑膜巨噬细胞基本消失。用 Vimentin 标记的细胞免疫荧光化学染色显示 SF 细胞纯度超过95%;用 Vimentin 和 CD90.2标记的流式细胞术显示其纯度达到95%,用 CD54标记其纯度大约为80%。结论利用 C57BL/6小鼠探索出一种改良的小鼠 SF 的原代培养方法是一种简便易行的小鼠 SF 的原代培养方法。