目的 使用siRNA沉默大鼠心肌细胞的镁离子转运蛋白1(MagT1),检测细胞内Mg2+浓度变化和细胞凋亡情况.方法 设计并合成MagT1 siRNA序列,转入原代培养大鼠心肌细胞沉默MagT1,使用反转录PCR和Western blot检测MagT1mRNA和蛋白表达情况,荧光显微镜检测细胞内Mg2+浓度变化情况,流式细胞法检测细胞凋亡情况.结果 相比阴性siRNA组,MagT1 siRNA转染大鼠心肌细胞48 h,MagT1 mRNA的沉默效率为51.83% (P<0.05),MagT1蛋白的沉默效率为56.75%(P<0.05),胞内Mg2+浓度降低29.13% (P<0.05),细胞凋亡率为31.18% (P<0.01);转染60 h,MagT1 mRNA的沉默效率为86.91% (P<0.01),MagT1蛋白质的沉默效率为83.85% (P<0.01),细胞内Mg2+浓度降低41.32% (P<0.01),细胞凋亡率为40.61% (P<0.01).结论 MagT1被显著沉默后,细胞内Mg2+浓度显著降低,细胞凋亡显著提高,细胞生命活动受到较大影响.
作者:滕飞翔;沈之君;赵洪侠;张栋梁;杨留才
来源:重庆医学 2018 年 47卷 3期