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目的 研究热休克蛋白27 (HSP27)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制.方法 培养人脐静脉内皮细胞,采用MTT法检测Hcy对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)存活率的影响;Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒及流式细胞术检测Hcy及HSP27对细胞凋亡的影响;设计实验,采用总一氧化氮检测试剂盒(硝酸还原酶法)检测细胞培养液中NO水平、2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)活性氧(ROS)检测试剂盒及流式细胞术检测细胞内ROS来研究可能的保护机制.结果 HUVECs与不同浓度的Hcy作用后,0 mmol/L组存活率均值为97.33%,Hcy 0.2 mmol/L组存活率均值为95.17%,Hcy 0.4 mmol/L组存活率均值为90.72%,Hcy 0.6 mmol/L组存活率均值为78.29%,Hcy 0.8 mmol/L组存活率均值为63.65%,Hcy 1.0 mmol/L组存活率均值为41.51%.0 mmol/L组与Hcy 0.2 mmol/L组比较,差异无统计学意义(P>0.05);Hcy 0.4、0.6、0.8、1.0 mmol/L组存活率均低于0 mmol/L组,差异有统计学意义(均P<0.05).HSP27浓度越高,细胞的存活率越高,呈浓度依赖性,HSP27对HUVECs损伤具有保护作用.Hcy能够诱发内皮细胞凋亡,而HSP27能显著抑制这种凋亡,表明HSP27能减少Hcy对内皮细胞的损害.HSP27能抑制Hcy引起NO的减少和抑制Hcy诱导ROS的产生.结论 HSP27通过影

作者:赵艳红;刘涛

来源:重庆医学 2018 年 47卷 7期

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作者:
赵艳红;刘涛
来源:
重庆医学 2018 年 47卷 7期
标签:
热休克蛋白质类 动脉粥样硬化 同型半光氨酸 血管内皮细胞 保护机制 heat-shock proteins atherosclerosis homocysteine vascular endothelial cell protection mechanism
目的 研究热休克蛋白27 (HSP27)对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制.方法 培养人脐静脉内皮细胞,采用MTT法检测Hcy对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)存活率的影响;Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒及流式细胞术检测Hcy及HSP27对细胞凋亡的影响;设计实验,采用总一氧化氮检测试剂盒(硝酸还原酶法)检测细胞培养液中NO水平、2',7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)活性氧(ROS)检测试剂盒及流式细胞术检测细胞内ROS来研究可能的保护机制.结果 HUVECs与不同浓度的Hcy作用后,0 mmol/L组存活率均值为97.33%,Hcy 0.2 mmol/L组存活率均值为95.17%,Hcy 0.4 mmol/L组存活率均值为90.72%,Hcy 0.6 mmol/L组存活率均值为78.29%,Hcy 0.8 mmol/L组存活率均值为63.65%,Hcy 1.0 mmol/L组存活率均值为41.51%.0 mmol/L组与Hcy 0.2 mmol/L组比较,差异无统计学意义(P>0.05);Hcy 0.4、0.6、0.8、1.0 mmol/L组存活率均低于0 mmol/L组,差异有统计学意义(均P<0.05).HSP27浓度越高,细胞的存活率越高,呈浓度依赖性,HSP27对HUVECs损伤具有保护作用.Hcy能够诱发内皮细胞凋亡,而HSP27能显著抑制这种凋亡,表明HSP27能减少Hcy对内皮细胞的损害.HSP27能抑制Hcy引起NO的减少和抑制Hcy诱导ROS的产生.结论 HSP27通过影