目的:分析乙型肝炎病毒preS 2蛋白在3′末端缺失的preS/S基因转基因小鼠肝脏中的分布及其病理学作用.方法:采用原核显微注射法将质粒pcDNA3.1-preS/St注射入小鼠受精卵雄原核,制备转基因小鼠.PCR法在基因组水平筛选3′末端缺失的preS/S基因转基因小鼠首建者(founder)及后代;免疫组织化学法在蛋白水平检测preS 2蛋白在这些小鼠中的表达; H-E染色分析转基因小鼠肝组织的病理学变化.结果:经原核显微注射法将目的片段注射入受精卵雄原核后,共出生15只新生小鼠,其中存活7只,经PCR检测后获得2只founder转基因小鼠,命名为C57-TgN(preS/St)SMMU.免疫组织化学检测发现转基因小鼠肝细胞质中有preS 2蛋白表达,H-E染色发现转基因小鼠肝组织中央静脉周围有淋巴细胞聚集.将这2只转基因小鼠与正常同系异性小鼠交配,进行传代培育,PCR法筛选阳性转基因小鼠,目前已传至F2代.结论:本研究成功建立了稳定遗传3′末端缺失的preS/S基因并表达preS 2蛋白的转基因小鼠C57-TgN((preS/St)SMMU,它将是体内研究3′末端缺失的preS/S基因的表达产物在体内的生物学作用及其与肝细胞内细胞癌基因的转录激活之间关系的理想动物模型.
作者：金艳花；訾晓渊；姚玉成；熊俊；李建秀；苏小平；王新民；倪文君；丛文铭；杨康鹃；胡以平
来源：第二军医大学学报 2003 年 24卷 2期
