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目的:观察庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的诱导作用;研究在细胞凋亡过程中细胞周期调节蛋白cyclin E、CDK2和p27Kip1蛋白表达的改变,并探讨细胞凋亡与细胞周期调节蛋白表达之间的关系.方法:0.2~3.2 mg/ml的庆大霉素作用于体外培养的猪肾近端小管上皮细胞株(LLC-PK1细胞)24~96 h,MTT法测定庆大霉素对细胞增殖的抑制率,琼脂糖凝胶电泳法观察凋亡细胞DNA条带,流式细胞术测定细胞凋亡率(AI)和细胞增殖动力学,Western 印迹分析检测培养96 h时细胞内cyclin E、CDK2和p27Kip1的蛋白表达.结果:庆大霉素对LLC-PK1细胞增殖有抑制作用,庆大霉素具诱导细胞凋亡的作用,AI呈药物浓度和作用时间依赖性;庆大霉素致细胞周期停滞于G1期.随着庆大霉素浓度的增加,细胞内cyclin E和CDK2蛋白表达逐渐下调,而p27Kip1蛋白表达则逐渐上调.结论:庆大霉素诱导的LLC-PK1细胞凋亡与细胞周期调节蛋白cyclin E和CDK2表达下调以及p27Kip1表达上调有关.

作者:傅鹏;袁伟杰;崔若兰;许静;于光

来源:第二军医大学学报 2003 年 24卷 12期

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作者:
傅鹏;袁伟杰;崔若兰;许静;于光
来源:
第二军医大学学报 2003 年 24卷 12期
标签:
庆大霉素 肾小管上皮细胞 细胞凋亡 细胞周期调节蛋白
目的:观察庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的诱导作用;研究在细胞凋亡过程中细胞周期调节蛋白cyclin E、CDK2和p27Kip1蛋白表达的改变,并探讨细胞凋亡与细胞周期调节蛋白表达之间的关系.方法:0.2~3.2 mg/ml的庆大霉素作用于体外培养的猪肾近端小管上皮细胞株(LLC-PK1细胞)24~96 h,MTT法测定庆大霉素对细胞增殖的抑制率,琼脂糖凝胶电泳法观察凋亡细胞DNA条带,流式细胞术测定细胞凋亡率(AI)和细胞增殖动力学,Western 印迹分析检测培养96 h时细胞内cyclin E、CDK2和p27Kip1的蛋白表达.结果:庆大霉素对LLC-PK1细胞增殖有抑制作用,庆大霉素具诱导细胞凋亡的作用,AI呈药物浓度和作用时间依赖性;庆大霉素致细胞周期停滞于G1期.随着庆大霉素浓度的增加,细胞内cyclin E和CDK2蛋白表达逐渐下调,而p27Kip1蛋白表达则逐渐上调.结论:庆大霉素诱导的LLC-PK1细胞凋亡与细胞周期调节蛋白cyclin E和CDK2表达下调以及p27Kip1表达上调有关.