目的:了解抑癌基因LKB1对肺癌细胞A549血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的调控作用.方法:应用巢式PCR方法扩增LKB1基因编码区,构建LKB1的真核表达载体并以脂质体法转染A549细胞,G418筛选稳定表达细胞株;RT-PCR及Western印迹法检测LKB1、SP1和VEGF在A549细胞中的表达变化;siRNA技术干扰转录因子SP1的表达,RT-PCR及Western印迹法检测SP1和VEGF的表达变化.结果:外源性LKB1在A549细胞中稳定表达;LKB1蛋白下调SP1和VEGF的表达;SP1可被特异性siRNA分子有效抑制,siRNA介导的SP1沉默伴随VEGF表达下调.结论:LKB1可能通过负调控转录因子SP1的表达从而调控VEGF的表达.
作者：臧远胜；夏天保；李强
来源：第二军医大学学报 2007 年 28卷 6期
