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目的 对自行研制的可诱导共刺激分子-Ig融合蛋白的理化性质和体内生物学活性进行分析鉴定.方法 采用HCI水解法、Edman法、胰酶消化MALDI-TOF-MS质谱法分别测定该融合蛋白的氨基酸组成、N末端15个氨基酸序列、肽谱等理化性质,并通过CFSE标记体内检测淋巴细胞增殖反应实验研究其抑制同种淋巴细胞增殖的生物学活性.结果 氨基酸组成分析测得样品的氨基酸组成与ICOs-Ig理论值基本一致.蛋白N末端15个氨基酸序列为EINGSANYEMFIFHN,与ICOS-Ig理论值一致.MALDI-TOF-MS质谱测定共获得6个与理论预测值相符的肽段.ICOS-Ig可以明显抑制同种T细胞的体内增殖反应.结论 所研制的可诱导共刺激分子-Ig融合蛋白结构表达正确且具有体内抑制同种淋巴细胞增殖的活性,为该融合蛋白的质量标准研究奠定了基础.

作者:张鹏;王振猛;秦琴;王健;沈茜

来源:第二军医大学学报 2010 年 31卷 2期

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作者:
张鹏;王振猛;秦琴;王健;沈茜
来源:
第二军医大学学报 2010 年 31卷 2期
标签:
ICOS-Ig融合蛋白 氨基酸组成 氨基酸序列 肽谱 淋巴细胞增殖 ICOS-Ig fusion protein amino acid composition amino acid sequence peptide mapping lymphocyte proliferation
目的 对自行研制的可诱导共刺激分子-Ig融合蛋白的理化性质和体内生物学活性进行分析鉴定.方法 采用HCI水解法、Edman法、胰酶消化MALDI-TOF-MS质谱法分别测定该融合蛋白的氨基酸组成、N末端15个氨基酸序列、肽谱等理化性质,并通过CFSE标记体内检测淋巴细胞增殖反应实验研究其抑制同种淋巴细胞增殖的生物学活性.结果 氨基酸组成分析测得样品的氨基酸组成与ICOs-Ig理论值基本一致.蛋白N末端15个氨基酸序列为EINGSANYEMFIFHN,与ICOS-Ig理论值一致.MALDI-TOF-MS质谱测定共获得6个与理论预测值相符的肽段.ICOS-Ig可以明显抑制同种T细胞的体内增殖反应.结论 所研制的可诱导共刺激分子-Ig融合蛋白结构表达正确且具有体内抑制同种淋巴细胞增殖的活性,为该融合蛋白的质量标准研究奠定了基础.