目的 构建癌基因p28GANK 缺失不同ankyrin序列的突变体,进一步研究p28GANK 的功能及在肝癌发生发展中的作用.方法 利用QuikChang Site-Directed Mutagenesis Kit 构建p28GANK 5个ankyrin 缺失突变体并检测各个突变体对p53的影响. 结果 构建出分别缺失第1个ankyrin(39~71aa)、第2个ankyrin (72~104aa)、第3个ankyrin(105~137aa)、第4个ankyrin(138~170aa)和第5个ankyrin(171~203aa)的突变体,琼脂糖凝胶电泳及蛋白免疫印迹法验证正确.野生型p28GANK 可促进p53降解,其他突变体对p53的表达无明显影响. 结论成功构建了p28GANK 的5个突变体,证实p28GANK对p53的调控需要全部的ankyrin序列,为ankyrin的研究和p28GANK对肝癌的调控作用研究奠定了基础.
作者:任一彬;付静;陈瑶;王红阳
来源:第二军医大学学报 2010 年 31卷 10期