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目的 观察和分析大脑皮质细胞低氧条件液对神经干细胞增殖的影响,并探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)两条信号通路在此过程中的作用.方法 原代培养出生后24 h内SD大鼠大脑皮质细胞5d后,全量换液并在4% O2、1% O2和常氧环境下继续培养细胞6h以制备低氧条件液和常氧条件液.分别用3种条件液及结合使用PI3-K、JNK信号通路抑制剂LY294002和SP600125悬浮培养神经干细胞,并用免疫荧光染色鉴定神经干细胞,使用增殖效率(神经球数量)和增殖速度(神经球直径)分析神经干细胞的增殖情况.结果 (1)4%低氧条件液组和常氧条件液组神经干细胞的增殖效率高于1%低氧条件液组(P<0.01),但前两者之间差异无统计学意义;(2)与常氧条件液相比,两个低氧条件液均提高了神经干细胞的增殖速度(P<0.01),且4%低氧条件液组神经干细胞的增殖速度较1%低氧条件液组快(P<0.01);(3)在4%低氧条件液中使用LY294002和SP600125同时抑制了神经干细胞的增殖效率和增殖速度,且LY294002抑制作用在24 h之后尤为明显.结论 4%大脑皮质细胞低氧条件液能提高神经干细胞的增殖速度,PI3-K信号通路在此过程中发挥主要作用.

作者:蔡明;陆耀飞;娄淑杰

来源:第二军医大学学报 2013 年 34卷 2期

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蔡明;陆耀飞;娄淑杰
来源:
第二军医大学学报 2013 年 34卷 2期
标签:
大脑皮质 神经干细胞 细胞低氧 细胞增殖 磷脂酰肌醇3-激酶 c-Jun氨基末端激酶
目的 观察和分析大脑皮质细胞低氧条件液对神经干细胞增殖的影响,并探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3-K)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)两条信号通路在此过程中的作用.方法 原代培养出生后24 h内SD大鼠大脑皮质细胞5d后,全量换液并在4% O2、1% O2和常氧环境下继续培养细胞6h以制备低氧条件液和常氧条件液.分别用3种条件液及结合使用PI3-K、JNK信号通路抑制剂LY294002和SP600125悬浮培养神经干细胞,并用免疫荧光染色鉴定神经干细胞,使用增殖效率(神经球数量)和增殖速度(神经球直径)分析神经干细胞的增殖情况.结果 (1)4%低氧条件液组和常氧条件液组神经干细胞的增殖效率高于1%低氧条件液组(P<0.01),但前两者之间差异无统计学意义;(2)与常氧条件液相比,两个低氧条件液均提高了神经干细胞的增殖速度(P<0.01),且4%低氧条件液组神经干细胞的增殖速度较1%低氧条件液组快(P<0.01);(3)在4%低氧条件液中使用LY294002和SP600125同时抑制了神经干细胞的增殖效率和增殖速度,且LY294002抑制作用在24 h之后尤为明显.结论 4%大脑皮质细胞低氧条件液能提高神经干细胞的增殖速度,PI3-K信号通路在此过程中发挥主要作用.