目的 建立分离大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)及将其定向诱导分化为血管内皮细胞(endothelial cells,EDCs)的方法,并通过观察microRNA126的表达规律初步探索其在定向分化中的调控作用.方法 通过反复贴壁及人工分选方法进行大鼠骨髓MSCs的体外分离纯化及扩增,运用免疫荧光法检测MSCs中CD34、CD105和CD73的表达.应用MEF诱导分化培养液将MSCs定向诱导分化为EDCs,采用qRT-PCR法检测细胞诱导分化过程不同时间点EDCs特征基因CD34、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)及调控小RNA分子microRNA126的表达.结果 经分离纯化的骨髓MSCs CD34呈阴性表达,CD105呈强阳性表达,CD73呈阳性表达,证实骨髓MSCs分离成功,且细胞均一性较好,占细胞总数的90％以上.MSCs定向诱导为EDCs早期分化过程中,在诱导前期第1～4天,VE-cadherin和CD34基因呈阴性表达;第5～6天VE-cadherin和CD34表达显著;第7～9天,VE-cadherin呈持续阳性表达,而CD34于第7天下降,第8～9天又呈阳性表达.microRNA126在分化过程中的表达趋势与CD34一致.结论 成功建立了骨髓MSCs的分离方法及定向诱导分化为EDCs的方法;microRNA126在MSCs向EDCs的定向分化过程中可能起一定的调控作用.
作者：吴弘；徐晓晶；吴峰；储国俊；赵仙先；秦永文
来源：第二军医大学学报 2013 年 34卷 12期
