目的 探讨硫化氢(H2S)对Aβ25-35诱导的小鼠成神经细胞瘤细胞Neuro-2a自噬的影响及其潜在机制.方法 将Neuro-2a细胞随机分为空白对照组、Aβ25-35处理组、Aβ25-a5+NaHS组、Aβ25 35+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、NaHs组及Aβ25-35+ NaHS+ LY294002组.Aβ25-35+ NaHS组和Aβ25-35+ 3-MA组细胞分别用NaHS和3-MA预处理2h后均加用Aβ25-35继续处理24 h;Aβ25-35+ NaHS+ LY294002组除加入NaHS预处理外需在Aβ25-35处理前0.5h加入特异性PI3K/Akt通路抑制剂LY294002.采用MTT法观察各组细胞存活率,蛋白质印迹法检测自噬蛋白Beclin-1、微管相关蛋白(LC3)及P62的表达,免疫荧光法检测LC3的表达及分布,透射电镜法观察自噬体的形成.结果 (1)与空白对照组相比,Aβ25-35作用细胞后细胞存活率降低(P＜0.05),Beclin-1及LC3-Ⅱ表达增加,P62表达降低(P＜0.05),荧光显微镜及电镜下可见细胞自噬体明显增多.(2)与Aβ25-35组相比,Aβ25-35+3-MA组和Aβ25-35+NaHS组细胞存活率均增高(P＜0.05),Beclin-1及LC3-Ⅱ表达降低,P62表达增高(P＜0.05),自噬体减少.(3)Aβ25-35+NaHS组p-Akt和p-mTOR的表达高于Aβ25-35组(P＜0.05),而加入LY294002后,Aβ25-35+NaHS+ LY294002组细胞p-Akt和p-mTOR表达与Aβ25-35+ NaHS组相比降低(P＜0.05).结论 外

作者：高丹；柯莉；赵丰丽；乔沛丰；晏勇

来源：第二军医大学学报 2016 年 37卷 7期