目的 探讨miRNA-544-3p对乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)诱导的肝细胞癌的影响及分子机制.方法 培养含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和HBx的慢病毒稳转小鼠永生化肝前体细胞株14-19(HBx-EGFP-14-19细胞),并通过向昆明小鼠肝门静脉注射上述细胞构建可长期稳定表达HBx的模型,采用qPCR检测miRNA-544-3p在HBx-EGFP-14-19细胞及小鼠模型肝组织中的表达.在HBx-EGFP-14-19细胞中瞬时转染miRNA-544-3p模拟物(mimic)或抑制剂(inhibitor),应用划痕愈合实验、Transwell细胞迁移和侵袭实验检测miRNA-544-3p对HBx-EGFP-14-19细胞迁移和侵袭的影响,采用qPCR和蛋白质印迹法探究miRNA-544-3p对二磷酸腺苷核糖基化因子6(Arf6)、Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达的调控作用.结果 成功构建了可长期稳定表达HBx的小鼠模型,该小鼠在造模后360 d处死时可见肝组织有恶性肿瘤生成.与对照组相比,HBx-EGFP-14-19细胞和HBx模型小鼠各时间点(造模后30、90、180、360 d)肝组织中miRNA-544-3p表达水平均降低(P均<0.05).与对照组比较,转染miRNA-544-3p mimic的HBx-EGFP-14-19细胞迁移和侵袭能力均降低,转染miRNA-544-3p inhibitor的HBx-EGFP-14-19细胞迁移和侵袭能力均增强(P均<0.05).qPCR和蛋白质印迹法检测结果显示miRNA-544-3p低表达与Arf6

作者：况钦；吴勇；杜彬；毋楠；周梦瑶；杨鑫玥；卢杨；冯涛

来源：海军军医大学学报 2022 年 43卷 6期