目的 探究miRNA-4286在非小细胞肺癌细胞对顺铂敏感性中的调节作用及相关机制.方法 采用qPCR法检测人非小细胞肺癌A549细胞和顺铂耐药A549细胞(A549/DDP细胞)中miRNA-4286的表达水平.采用miRNA-4286模拟物和抑制剂构建miRNA-4286的过表达和低表达细胞模型,分为过表达阴性对照组、过表达miRNA-4286组、低表达阴性对照组、低表达miRNA-4286组.采用CCK-8法、平板集落形成实验和流式细胞术检测miRNA-4286表达对非小细胞肺癌细胞的顺铂敏感性影响;采用TargetScan、qPCR法和蛋白质印迹法检测miRNA-4286和核输出蛋白1(XPO1)的靶向关系;采用蛋白质印迹法检测在顺铂的作用下改变miRNA-4286后非小细胞肺癌细胞的凋亡蛋白胱天蛋白酶3(caspase 3)、B淋巴细胞瘤2相关X蛋白(Bax)表达量的改变.结果 miRNA-4286在A549细胞中的表达高于A549/DDP细胞(P<0.01).在0~2μg/mL顺铂的作用下,过表达miRNA-4286后A549细胞增殖率降低、凋亡率增高(P<0.05或P<0.01);低表达miRNA-4286后结果与之相反(P<0.05或P<0.01).过表达miRNA-4286后A549细胞中XPO1的mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05或P<0.01),低表达miRNA-4286后结果与之相反(P<0.05或P<0.01).在顺铂作用下,下调miRNA-4286抑制A549细胞caspase 3、Bax的表达(P<0.05或P<0.01),而下调XP
作者:王培绒;江涛
来源:海军军医大学学报 2022 年 43卷 7期