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[目的]探讨RNA干扰对小鼠腹腔活化巨噬细胞表达TNF-α的抑制作用.[方法]原代培养小鼠腹腔巨噬细胞,构建针对小鼠TNF-α的siRNA表达框架,转染细胞,用RT-PCR方法检测TNF-αmRNA的水平,用ELISA方法检测TNF-α分泌情况.[结果]从凝胶电泳图像TNF-α、β-actin灰度值比可以看出干扰组TNF-αmRNA的水平0.18±0.03较阳性对照组0.91±0.05及阴性对照组0.85±0.10明显降低(P<0.05).干扰组TNF-α分泌量(21.87±1.20)pg/mL较阳性对照组(28.02±1.03)pg/mL及阴性对照组(27.64±1.92)pg/mL均明显降低(P<0.05).[结论]RNA干扰可以有效地抑制原代培养小鼠腹腔巨噬细胞TNF-αmRNA水平及其蛋白分泌.

作者:孙杰;高颖;姜妙娜;郑宁宁;宋晓宇;张海鹏

来源:大连医科大学学报 2008 年 30卷 5期

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作者:
孙杰;高颖;姜妙娜;郑宁宁;宋晓宇;张海鹏
来源:
大连医科大学学报 2008 年 30卷 5期
标签:
RNA干扰 siRNA表达框架 转录后基因沉默 肿瘤坏死因子α
[目的]探讨RNA干扰对小鼠腹腔活化巨噬细胞表达TNF-α的抑制作用.[方法]原代培养小鼠腹腔巨噬细胞,构建针对小鼠TNF-α的siRNA表达框架,转染细胞,用RT-PCR方法检测TNF-αmRNA的水平,用ELISA方法检测TNF-α分泌情况.[结果]从凝胶电泳图像TNF-α、β-actin灰度值比可以看出干扰组TNF-αmRNA的水平0.18±0.03较阳性对照组0.91±0.05及阴性对照组0.85±0.10明显降低(P<0.05).干扰组TNF-α分泌量(21.87±1.20)pg/mL较阳性对照组(28.02±1.03)pg/mL及阴性对照组(27.64±1.92)pg/mL均明显降低(P<0.05).[结论]RNA干扰可以有效地抑制原代培养小鼠腹腔巨噬细胞TNF-αmRNA水平及其蛋白分泌.