目的 探讨银杏内酯B(GB)对TNFα刺激的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中活性氧(ROS)产生的影响及其机制.方法 将预先培养好的HUVECs分组:正常对照组；TNFα刺激组；GB预处理组:分别用GB(25 mg/L),GB(50 mg/L),GB(100 mg/L)预处理细胞1h后再用TNFα刺激24 h；质粒转染组:用转染p47phox的siRNA作用24h后再用TNFα刺激24 h.用小分子RNA干扰(siRNA)技术消除人脐静脉内皮细胞的NADPH氧化酶p47phox亚基；用分子探针2,7-DCF测定各组细胞内ROS的产生量；用RT-PCR、细胞免疫组化及Western blotting等方法检测处理后各组细胞的p47phoxmRNA和蛋白的表达.结果 TNFα刺激使细胞内ROS的产生量较对照组增加了155.4％ (P =0.003)；GB(25 mg/L),GB(50 mg/L),GB(100 mg/L)分别使TNFα诱导的HUVECs内ROS的水平降低了9.2％ (P=0.157),35.4％ (P =0.014),48.0％ (P =0.005).TNFα作用细胞24 h后,p47phox的mRNA表达水平较对照组增加了212.8％ (P =0.009),蛋白表达增加了156.2％ (P =0.001)；GB预处理使TNFα诱导的p47phoxmRNA表达水平降低了43.6％ (P =0.021),蛋白表达水平降低了53.0％ (P =0.002).p47phox的siRNA完全阻断TNFα诱导ROS的产生.结论 GB能够抑制内皮细胞中TNFα诱导的ROS的产生,主要机制是通过抑制NADPH氧化酶p47phox亚

作者：于晓红；王小明；朱皓；李真；刘俊

来源：大连医科大学学报 2013 年 35卷 4期