目的 重组人SDF-1β在大肠杆菌中表达并获得纯化的有生物学活性的SDF-1β蛋白。方法 以pET32a(+)-SDF-1为人SDF-1β克隆基因的表达载体，以大肠杆菌AD494（DE3）pLysS为表达菌，在IPTG诱导下表达出一个由230个氨基酸残基组成的硫氧还蛋白（thioredoxin）-SDF-1β的融合蛋白（26×103）。经细菌裂解、金属离子螯合亲和层析、肠激酶消化以游离SDF-1β、阳离子交换层析和逆向高效液相层析等步骤纯化目的蛋白。以蛋白印迹、纯化产物的N端氨基酸测序及配体结合试验、微生理监测术鉴定纯化产物的生化性质及生物学活性。结果 在经诱导的发酵菌中融合蛋白占总菌体蛋白的10
作者：郑红；Stephen C Peiper；朱锡华
来源：第三军医大学学报 2001 年 23卷 1期
