目的探讨苦瓜核糖体失活蛋白(Rib osomal inactivating protein, RIP)诱导HL-60细胞凋亡的活性,以及对HL-60细胞Bcl -2、Bax、caspase-3表达变化的影响及其分子机制.方法以一定浓度苦瓜RIP处理HL-60细胞24~72 h,用TUNEL法检测细胞凋亡.运用RT-PCR和W estern blot免疫印记法检测 Bcl-2、Bax、caspase-3 mRNA和蛋白表达的变化. 结果苦瓜RIP在一定作用浓度下可使HL-60细胞发生凋亡,且随着作用时间的延长凋亡细胞比例逐渐升高.在此过程中,HL-60细胞的caspase-3 mRNA的表达及其胞内活性亚单位水平显著升高(P<0.05),Bcl-2 mRNA表达变化虽不显著,但其蛋白水平明显降低(P<0.05),与此同时,Bax mRNA和蛋白表达均有所上调.结论在苦瓜RIP诱导的HL-60细胞凋亡中,caspase-3发挥了极为重要的作用,而Bcl-2和Bax 可能通过其表达量的变化、转录后调节等方式对细胞凋亡发挥重要的调控功能.
作者:郎海滨;糜漫天;程天民;张乾勇;朱俊东
来源:第三军医大学学报 2003 年 25卷 13期