目的利用分子生物学技术,构建pCAG-JG双顺反子真核表达质粒,为研制新型的日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)核酸疫苗奠定基础.方法 RT-PCR扩增JEV的prM-E-NS1和小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulatingfactor,GM-CSF)后,分别克隆人中间载体pIRES,经酶切获得prM-E-NS1-IRES-GM-CSF片段,并将其插入pCAGGSP7质粒,鉴定阳性重组子.结果成功的将prM-E-NS1-IRES-GM-CSF片段插入到pCAGGSP7质粒,测序鉴定结果正确,该质粒命名为pCAG-JG.结论成功的构建了pCAG-JG双顺反子真核表达质粒.
作者:高娜;彭涛;陈炜;张俊磊;王嘉丽;万颖杰;陈宗涛;李东英;田衍平;安静
来源:第三军医大学学报 2006 年 28卷 10期