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目的 筛选与类脂A(lipid A)具有较高结合活性的中药,从中提取具有拮抗内毒素(lipopolysaccharide, LPS)活性的物质.方法 采用生物传感技术,以lipid A为靶点,检测42种中药的水提物与lipid A的结合活性;以白鲜皮为研究对象,通过大孔吸附树脂、溶剂萃取、聚酰胺柱层析和高效液相色谱(HPLC)法,分离提取与lipid A结合活性较高的组分;动态比浊法鲎试验检测HPLC产物DPR-1~3对LPS(0.1 ng/ml)的中和作用;ELISA法检测DPR-2对LPS(100 ng/ml)刺激的RAW264.7细胞释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的影响.结果 8种中药水提物与lipid A具有较高的结合活性(RU>100 arc/s);从白鲜皮中逐步分离出与lipid A结合活性较高的组分,经HPLC法获得3种物质DPR-1~3;DPR-2对LPS具有一定的中和作用,在8 μg/ml浓度以上可显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞释放TNF-α和IL-6 (P<0.05),并具有剂量效应关系.结论 从42种中药中筛选出与lipid A具有较高结合活性的中药白鲜皮,并从中分离提取出抗LPS活性物质DPR-2,其抗LPS活性可能与DPR-2对LPS的中和活性有关.

作者:郭毅斌;曹红卫;范莉;杨大成;鲁永玲;吕根法;郑江;肖光夏

来源:第三军医大学学报 2007 年 29卷 17期

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作者:
郭毅斌;曹红卫;范莉;杨大成;鲁永玲;吕根法;郑江;肖光夏
来源:
第三军医大学学报 2007 年 29卷 17期
标签:
白鲜皮 内毒素 生物传感器 高效液相色谱
目的 筛选与类脂A(lipid A)具有较高结合活性的中药,从中提取具有拮抗内毒素(lipopolysaccharide, LPS)活性的物质.方法 采用生物传感技术,以lipid A为靶点,检测42种中药的水提物与lipid A的结合活性;以白鲜皮为研究对象,通过大孔吸附树脂、溶剂萃取、聚酰胺柱层析和高效液相色谱(HPLC)法,分离提取与lipid A结合活性较高的组分;动态比浊法鲎试验检测HPLC产物DPR-1~3对LPS(0.1 ng/ml)的中和作用;ELISA法检测DPR-2对LPS(100 ng/ml)刺激的RAW264.7细胞释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)的影响.结果 8种中药水提物与lipid A具有较高的结合活性(RU>100 arc/s);从白鲜皮中逐步分离出与lipid A结合活性较高的组分,经HPLC法获得3种物质DPR-1~3;DPR-2对LPS具有一定的中和作用,在8 μg/ml浓度以上可显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞释放TNF-α和IL-6 (P<0.05),并具有剂量效应关系.结论 从42种中药中筛选出与lipid A具有较高结合活性的中药白鲜皮,并从中分离提取出抗LPS活性物质DPR-2,其抗LPS活性可能与DPR-2对LPS的中和活性有关.