目的 运用pADxsi系统构建带人PDX1与NKX6.1双基因表达腺病毒载体.方法 采用基因克隆技术,将目的 基因NKX6.1克隆至pShuttle-GFP-CMV中,得到pShuttle- GFP-CMV-NKX6.1;将PDX1克隆至pShuttle-CMV-GFP/CMV-NKX6.1上,替换掉GFP,得到pShuttle-CMV-PDX1/CMV-NKX6.1;将CMV-PDX1/CMV-NKX6.1从pShuttle-CMV-PDX1/CMV- NKX6.1转移到ADxsi骨架载体上,得到pADxsi-CMV-PDX1/CMV-NKX6.1,在293细胞中进行包装与扩增活病毒,病毒滴度测定;体外感染人胎肝间充质干细胞.结果 分别酶切重组人PDX1与NKX6.1基因表达穿梭质粒与腺病毒载体质粒,阳性克隆均获得与理论相一致的目的 条带;重组腺病毒感染人胎肝间充质干细胞比例达90
作者：唐小龙；张荣波；汪雪峰；张文
来源：第三军医大学学报 2010 年 32卷 4期
