目的 研究5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)筛选残存结肠癌细胞(drug surviving cells,DSCs)是否具有癌症干细胞(cancer stem cells,CSCs)属性及其增殖过程中免疫表型的改变.方法 应用5-FU对体外培养的结肠癌细胞株SW480进行处理,收集残存DSCs,检测其细胞周期、克隆形成率、CD133阳性率及在SCID小鼠体内的致瘤率;在无血清培养基(serum-free medium,SFM)中培养DSCs,观察干细胞球的形成及CD133表达改变;机械分离干细胞球所得第2代DSCs在含血清培养基(serum-supplied medium,SSM)中培养,利用免疫荧光及AB/PAS特染技术检测癌细胞CD133、Oct4、VEGF、CD34、CK8/18的表达改变及黏液分泌情况.结果 5-FU作用72 h后继续SSM中培养1周,SW480细胞大量死亡,少量残存的DSCs以G0~G1期细胞为主,克隆形成率及SCID小鼠体内致瘤率明显高于未经处理的SW480细胞(P<0.05);DSCs中CD133+细胞数明显高于未经处理组(P<0.05),VEGF+细胞数明显减少(P<0.05);DSCs在SFM中经过3周连续培养能够形成干细胞球,细胞球内高表达CD133,VEGF表达也轻度增高(P<0.05).第2代DSCs在SSM内生长时CD133、Oct4表达逐渐降低,而VEGF、CD34、CK8/18表达逐渐增高,并开始分泌黏液.结论 5-FU处理能富集CD133+结肠癌细胞,富集的残存癌细胞具有癌症干细胞属性,
作者:张军荣;穆继英;杨爱军;尚立娜;牛茜
来源:第三军医大学学报 2011 年 33卷 1期