目的 建立体外破骨细胞(osteoclasts,OCs)诱导分化模型,研究CD147对体外破骨细胞分化过程中基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases 2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases 9,MMP-9)合成与分泌的影响.方法 采用健康成人外周血分离单个核细胞贴壁培养,应用巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)与NF-κB受体活化因子配体(receptor or activator of NF-κB ligand,RANKL)诱导单个核细胞向Ocs分化.实验分为对照组(RANKL+M-CSF)与蛋白诱导组(RANKL+M-CSF+CD147蛋白).应用抗酒石酸酸性磷酸酶染色(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)及骨吸收实验检测鉴定OCs的分化成熟,Real-time PCR技术检测CD147、MMP-2和MMP-9 mRNA在破骨前体细胞(osteoclast precursor cells,OPCs)中表达变化,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞上清液中MMP-2、MMP-9的表达.结果 ①TRAP染色和骨吸收实验检测到破骨样细胞形成并具有骨吸收功能,建立体外Ocs诱导分化模型成功.②在24、48 h蛋白诱导组CD147 mRNA [(1.344±0.207)、(1.816±0.222)]、MMP-2 mRNA[(1.187±0.077)、(1.437±0.231)]及MMP-9 mRNA [(1.128±0.107)、( 2.353±0.679)]的相对表达量均高于相应的对照组(P<0.05)
作者:余世明;初同伟;廖通权;胡旭;刘玉刚;周跃
来源:第三军医大学学报 2011 年 33卷 14期