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目的 设计并合成新的靶向于雄激素受体(AR)的siRNA序列,转染前列腺癌细胞筛选最佳干扰序列.方法 设计并合成靶向于雄激素受体的siRNA,以不同浓度转染雄激素非依赖性前列腺癌细胞C4-2,确定最佳转染浓度.以最佳转染浓度转染细胞,分为siRNA Ⅰ组、siRNAⅡ组、siRNAⅢ组、阴性对照组、空白对照组和无关对照组.RT-PCR检测AR mRNA表达水平,Western blot检测AR蛋白表达水平.CCK-8分析绘制细胞生长曲线,观察C4-2细胞生长活性并筛选出抑制效果最佳的siRNA靶序列.结果 以不同浓度的AR siRNA转染C4-2细胞后,细胞生长活性降低(P<0.05),并筛选出100 nmol/L的最佳转染浓度;RT-PCR和Western blot结果显示转染后AR的mRNA和蛋白表达水平显著下降(P <0.05);CCK-8法检测结果显示各组细胞增殖活性显著降低,其中siRNA Ⅰ的抑制效果最为明显(P<0.05).结论 新设计合成的ARsiRNA能通过沉默AR表达高效抑制C4-2细胞的增殖.

作者:张淼;郭燕丽;王洛夫;李彦;李锐

来源:第三军医大学学报 2011 年 33卷 23期

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作者:
张淼;郭燕丽;王洛夫;李彦;李锐
来源:
第三军医大学学报 2011 年 33卷 23期
标签:
RNA干扰 雄激素受体 雄激素非依赖性前列腺癌
目的 设计并合成新的靶向于雄激素受体(AR)的siRNA序列,转染前列腺癌细胞筛选最佳干扰序列.方法 设计并合成靶向于雄激素受体的siRNA,以不同浓度转染雄激素非依赖性前列腺癌细胞C4-2,确定最佳转染浓度.以最佳转染浓度转染细胞,分为siRNA Ⅰ组、siRNAⅡ组、siRNAⅢ组、阴性对照组、空白对照组和无关对照组.RT-PCR检测AR mRNA表达水平,Western blot检测AR蛋白表达水平.CCK-8分析绘制细胞生长曲线,观察C4-2细胞生长活性并筛选出抑制效果最佳的siRNA靶序列.结果 以不同浓度的AR siRNA转染C4-2细胞后,细胞生长活性降低(P<0.05),并筛选出100 nmol/L的最佳转染浓度;RT-PCR和Western blot结果显示转染后AR的mRNA和蛋白表达水平显著下降(P <0.05);CCK-8法检测结果显示各组细胞增殖活性显著降低,其中siRNA Ⅰ的抑制效果最为明显(P<0.05).结论 新设计合成的ARsiRNA能通过沉默AR表达高效抑制C4-2细胞的增殖.