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目的 观察珠子参总皂苷H2O2所致氧化应激损伤保护效应并探讨其机制.方法 Wistar乳鼠心肌细胞原代培养,用H2 O2建立氧化应激损伤模型,然后用珠子参总皂苷(100、200 μg/ml)孵育24h后,观察细胞搏动频率,MTT法检测珠子参总皂苷对细胞活力的影响,流式细胞仪和Hoechst33258染色检测珠子参总皂苷对氧化应激诱导细胞凋亡及胞内ROS含量的影响,比色法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)含量,同时检测培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)含量,实时定量PCR技术检测珠子参总皂苷对SOD/GPX/CAT反应系统SOD1、SOD2、SOD3、CAT和GPX1基因表达的影响,Western blot检测珠子参总皂苷对细胞质和细胞核Nrf2蛋白表达的影响.结果 H2O2明显影响细胞活力和诱导凋亡(IC50为500 μmol/L),珠子参总皂苷(100、200 μg/ml)处理能显著增加心肌细胞搏动频率和存活率(P<0.01),抑制心肌细胞凋亡和改善细胞形态,降低细胞内ROS含量(P<0.01);减轻H2O2所致乳鼠心肌细胞培养液中LDH、CK释放量,同时能够升高SOD、CAT和GSH-Px活性,降低MDA含量(P <0.05,P<0.01);上调SOD/GPX/CAT反应系统基因表达水平和促进Nrf2核移位,增加心肌细胞核内Nrf2的表达水平(P<0.05,P<0.01).

作者:贺海波;石孟琼;罗涛;陈良金;周继刚;张继红;卢训丛

来源:第三军医大学学报 2012 年 34卷 15期

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作者:
贺海波;石孟琼;罗涛;陈良金;周继刚;张继红;卢训丛
来源:
第三军医大学学报 2012 年 34卷 15期
标签:
珠子参总皂苷 过氧化氢 心肌细胞 转录因子Nrf2 氧化应激 保护机制
目的 观察珠子参总皂苷H2O2所致氧化应激损伤保护效应并探讨其机制.方法 Wistar乳鼠心肌细胞原代培养,用H2 O2建立氧化应激损伤模型,然后用珠子参总皂苷(100、200 μg/ml)孵育24h后,观察细胞搏动频率,MTT法检测珠子参总皂苷对细胞活力的影响,流式细胞仪和Hoechst33258染色检测珠子参总皂苷对氧化应激诱导细胞凋亡及胞内ROS含量的影响,比色法测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)含量,同时检测培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)含量,实时定量PCR技术检测珠子参总皂苷对SOD/GPX/CAT反应系统SOD1、SOD2、SOD3、CAT和GPX1基因表达的影响,Western blot检测珠子参总皂苷对细胞质和细胞核Nrf2蛋白表达的影响.结果 H2O2明显影响细胞活力和诱导凋亡(IC50为500 μmol/L),珠子参总皂苷(100、200 μg/ml)处理能显著增加心肌细胞搏动频率和存活率(P<0.01),抑制心肌细胞凋亡和改善细胞形态,降低细胞内ROS含量(P<0.01);减轻H2O2所致乳鼠心肌细胞培养液中LDH、CK释放量,同时能够升高SOD、CAT和GSH-Px活性,降低MDA含量(P <0.05,P<0.01);上调SOD/GPX/CAT反应系统基因表达水平和促进Nrf2核移位,增加心肌细胞核内Nrf2的表达水平(P<0.05,P<0.01).