目的 比较Triton X-100和十二烷基硫酸钠(SDS)试剂对人关节软骨脱细胞处理后细胞外基质成分的变化,指导筛选适宜的制备.方法 首先制备人关节软骨微粒,再采用两种不同试剂分别作用于软骨细胞微粒,清洗和消化步骤相同,脱细胞完成后分别进行DNA、总氨基酸及总胶原和葡萄糖胺聚糖(GAG)含量检测,分为Triton X-100组和SDS组,并与对照组(正常软骨组织)进行基质成分的比较分析.结果 Triton X-100组、SDS组和对照组经脱细胞处理后其GAG含量分别为(84.71 ±3.72)、(122.63±6.05)、(232.78 ± 75.33)μg/mg,羟脯氨酸含量分别为(24.92±1.74)、(24.23±1.68)、(24.54±2.99) μg/mg,DNA含量分别为(0.242±0.065)、(0.225 ±0.057)、(5.679±1.873)μg/mg.结论 Triton X-100和SDS两种试剂均能将软骨微粒中软骨细胞成分有效去除,胶原成分保留量在两组中无明显差异;但是应用SDS行脱细胞处理后能保留更多的GAG成分,更有利于维持软骨细胞功能,是较好的材料制备技术.
作者:谭洪波;段小军;杨柳;徐永清;丁晶;杨军
来源:第三军医大学学报 2013 年 35卷 19期