目的 通过骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)与膀胱平滑肌细胞(bladder smooth muscle cells,BSMCs)接触共培养探讨组蛋白乙酰化对BMSCs分化能力的影响.方法 分别采用密度梯度离心法和胶原酶消化法培养大鼠BMSCs及BSMCs至第3代,并对BMSCs进行了鉴定；以单独培养的BMSCs作为对照组,接触共培养的BMSCs为实验组；运用免疫荧光化学染色法分别对2组BMSCs中的平滑肌标志性蛋白平滑肌α肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(smooth muscle-myosin heavy chain,SM-MHC)、Calponin进行检测,Western blot检测α-SMA蛋白、Calponin蛋白在BMSCs中的表达,并用微球菌核酸酶(micrococcal nuclease,MNase)对平滑肌3个标志性基因的启动子区进行了染色质开放性的检测,同时运用了ChIP技术分析了α-SMA、SM-MHC启动子区组蛋白乙酰化水平对BMSCs向平滑肌分化的影响.结果 大鼠原代BMSCs流式检测显示CD29表达阳性,阳性率为99.8％,CD31、CD45表达阴性,阳性率为6.30％、1.04％；免疫荧光显示平滑肌3种标志性蛋白的表达均随时间的延长而增加；Western blot结果显示随着共培养天数的增加α-SMA蛋白、Calponin蛋白在实验组中的表达相比对照组有明显的增加；MNase显示实验组的BMSCs

作者：徐梦遥；王延洲；徐惠成

来源：第三军医大学学报 2013 年 35卷 21期