目的 探讨干细胞标记物Nanog对结直肠癌细胞的自我更新以及转移能力的影响.方法 将本实验室已构建的Nanog启动子携带绿色荧光蛋白的慢病毒载体Lv-pNanog-GFP感染入结直肠癌细胞系HCT116,并经流式分选得到GFP表达阳性和阴性的细胞,通过Western blot检测病毒的有效性,克隆形成实验和成球实验检测肿瘤细胞的自我更新能力,Transwell实验检测肿瘤细胞的转移能力.结果 细胞系在感染病毒12 h后,倒置荧光显微镜下可观察到GFP的荧光表达,说明病毒Lv-pNanog-GFP可稳定感染人结直肠癌细胞HCT116,且GFP的阳性率为5.9％.Western blot结果显示,根据GFP所分选出的细胞能准确的对应Nanog的表达量.Nanog阳性细胞的克隆形成率[(56.3±2.87)％]显著大于Nanog阴性细胞的克隆形成率[(19±2.16)％](P＜0.05).Nanog阳性细胞所形成的干细胞球体积明显增大且成球率[(34±4)％]显著大于Nanog阴性细胞[(10.67±6.43)％](P＜0.05),说明Nanog阳性细胞具有更强的自我更新能力.Nanog阳性细胞穿过Transwell小室的细胞数(175.8±12.89)比Nanog阴性细胞(74.6±16.55)显著增多(P＜0.05),说明Nanog阳性细胞具有更强的转移能力.结论 在结直肠癌细胞中Nanog调控肿瘤细胞的自我更新以及转移能力.
作者：朱传琳；姚超；钱程；徐先林；欧刚卫
来源：第三军医大学学报 2014 年 36卷 1期
