目的 探讨Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)促进平滑肌源性泡沫细胞的形成是否与三磷酸腺苷-结合盒转运子A1(ATP-binding cassette transporter,ABCA1)表达异常相关.方法 组织贴块法培养原代血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs);细胞分为野生型(Wild type)空白对照组、Wild type氧化低密度脂蛋白(oxLDL)组、TLR4敲除(TLR4-/-)空白对照组和TLR4-/-oxLDL组;油红O染色观察VSMCs内脂质聚集,并用异丙醇萃取油红O测定光密度值;RT-qPCR、Western blot检测VSMCs中TLR4、ABCA1、IL-1β及TNF-α mRNA和蛋白表达水平;细胞免疫荧光染色鉴定原代VSMCs及观察核转录因子-kappa B(NF-κB)核转位.结果 ①Wild type oxLDL组中见细胞内大量脂滴形成,油红O光密度值为Wild type空白对照组的2.3倍(P<0.01);TLR4-/-oxLDL组中只见少许脂质沉积于细胞内,油红O光密度值与TLR4-/-空白对照组相比无明显变化(P>0.05).②Wild type oxLDL组ABCA1 mRNA及蛋白表达水平较Wild type空白对照组分别下降61% (P <0.05),44% (P <0.01);TLR4-/-oxLDL组ABCA1 mRNA及蛋白表达水平分别为TLR4--空白对照组的2.3倍(P<0.05),1.7倍(P<0.05).③Wild type oxLDL组VSMCs中NF-κB核转位明显增多,IL-1β和TNF-α mRNA表达较Wild
作者:郭露;张莉莉;曹小洁;刘赟;廖少琼;黎炳护;皮燕;尹延伟;李敬诚
来源:第三军医大学学报 2014 年 36卷 7期