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目的 通过实验纯化出特异性尖吻蝮蛇蛇毒多克隆抗体并检测其生物活性.方法 以尖吻蝮蛇蛇毒免疫新西兰兔,利用Econo-Pac Protein A kit及CNBr activated sepharose 4B凝胶对兔源性抗蛇毒血清抗体进行纯化,制备特异性尖吻蝮蛇蛇毒多克隆抗体,经Western blot和ELISA方法对抗体进行评价,通过出血抑制实验及致死性保护实验评价抗体的生物活性.结果 成功纯化出特异性抗尖吻蝮蛇蛇毒多克隆抗体,ELISA检测抗体效价>3 200,Western blot证实多克隆抗体能识别蛇毒中大多数毒素蛋白,出血抑制实验证实该抗体能有效抑制蛇毒所致的皮下出血,在致死性保护实验中,该抗体对2LD50和4LD50蛇毒分别起到100%和54%的保护作用.结论 纯化获得的尖吻蝮蛇蛇毒多克隆抗体具有较好特异性和生物活性.

作者:曹宇亮;张雷;刘明华

来源:第三军医大学学报 2014 年 36卷 9期

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作者:
曹宇亮;张雷;刘明华
来源:
第三军医大学学报 2014 年 36卷 9期
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尖吻蝮蛇 多克隆抗体 抗体纯化 Deinagkistrodon acutus polyclonal antibodies antibody purification
目的 通过实验纯化出特异性尖吻蝮蛇蛇毒多克隆抗体并检测其生物活性.方法 以尖吻蝮蛇蛇毒免疫新西兰兔,利用Econo-Pac Protein A kit及CNBr activated sepharose 4B凝胶对兔源性抗蛇毒血清抗体进行纯化,制备特异性尖吻蝮蛇蛇毒多克隆抗体,经Western blot和ELISA方法对抗体进行评价,通过出血抑制实验及致死性保护实验评价抗体的生物活性.结果 成功纯化出特异性抗尖吻蝮蛇蛇毒多克隆抗体,ELISA检测抗体效价>3 200,Western blot证实多克隆抗体能识别蛇毒中大多数毒素蛋白,出血抑制实验证实该抗体能有效抑制蛇毒所致的皮下出血,在致死性保护实验中,该抗体对2LD50和4LD50蛇毒分别起到100%和54%的保护作用.结论 纯化获得的尖吻蝮蛇蛇毒多克隆抗体具有较好特异性和生物活性.