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目的 探讨人和大鼠膀胱平滑肌细胞是否存在自噬,以阐明自噬在膀胱疾病中的作用.方法 雌性SD大鼠8只,2~3月龄,体质量200 ~ 230 g.人膀胱标本(n=4)来自于西南医院泌尿外科膀胱癌全切患者.HE染色观察膀胱肌层定位.透射电镜(TEM)用于人和大鼠膀胱平滑肌细胞自噬小体鉴定.免疫荧光双标用于人和大鼠微管相关蛋白1轻链3(LC3)和平滑肌肌动蛋白(α-SMA)共定位.Western blot和RT-PCR检测人和大鼠膀胱肌层组织LC3蛋白和mRNA表达.结果 TEM证实人和大鼠膀胱平滑肌细胞存在自噬小体.免疫荧光双标和Western blot证实人和大鼠膀胱平滑肌细胞存在自噬标记蛋白LC3的表达.RT-PCR证实人和大鼠膀胱平滑肌细胞存在自噬标记蛋白LC3 mRNA的表达.结论 人和大鼠膀胱平滑肌细胞存在自噬,这种低水平自噬可能在维持膀胱平滑肌细胞自身稳态中起到重要作用.

作者:赵江;董兴有;杨星亮;王亮;李龙坤;周占松;宋波

来源:第三军医大学学报 2014 年 36卷 13期

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赵江;董兴有;杨星亮;王亮;李龙坤;周占松;宋波
来源:
第三军医大学学报 2014 年 36卷 13期
标签:
自噬 膀胱平滑肌 膀胱 autophagy bladder smooth muscle bladder
目的 探讨人和大鼠膀胱平滑肌细胞是否存在自噬,以阐明自噬在膀胱疾病中的作用.方法 雌性SD大鼠8只,2~3月龄,体质量200 ~ 230 g.人膀胱标本(n=4)来自于西南医院泌尿外科膀胱癌全切患者.HE染色观察膀胱肌层定位.透射电镜(TEM)用于人和大鼠膀胱平滑肌细胞自噬小体鉴定.免疫荧光双标用于人和大鼠微管相关蛋白1轻链3(LC3)和平滑肌肌动蛋白(α-SMA)共定位.Western blot和RT-PCR检测人和大鼠膀胱肌层组织LC3蛋白和mRNA表达.结果 TEM证实人和大鼠膀胱平滑肌细胞存在自噬小体.免疫荧光双标和Western blot证实人和大鼠膀胱平滑肌细胞存在自噬标记蛋白LC3的表达.RT-PCR证实人和大鼠膀胱平滑肌细胞存在自噬标记蛋白LC3 mRNA的表达.结论 人和大鼠膀胱平滑肌细胞存在自噬,这种低水平自噬可能在维持膀胱平滑肌细胞自身稳态中起到重要作用.