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目的 探讨人参总皂苷TSPG单独或联合人促红细胞生成素(EPO)对人白血病细胞KG1-α增殖的影响及机制探讨.方法 体外培养KG1-α细胞,选取处于对数生长期的细胞用于实验.空白对照组予以常规培养;人参总皂苷TSPG组分别加入25、50、100、200、400 mg/L TSPG;人参总皂苷+EPO组加入上述等量TSPG,同时加入0.5 U/L EPO,并设置EPO对照组.培养3、7、14 d后用CCK-8法检测TSPG单独或联合EPO对KG1-α细胞增殖的影响;运用Real-time PCR 技术检测EPOR、STAT5、Jak2、AKT等EPO/EPOR通路相关基因的表达.用Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、P53、P16等蛋白的表达,EPOR蛋白的表达及其活性.结果 人参总皂苷TSPG在体外能明显抑制KG1-α细胞的增殖,100 μmol/L为最适作用浓度,7d为最适作用时间,如果在EPO存在的条件下,其最适浓度则降低到75 mg/L;与对照组相比,在EPO存在的条件下人参总皂苷TSPG诱导可明显使细胞阻滞于G0/G1期,若不使用EPO则TSPG对细胞周期无影响;Real-time PCR检测结果显示TSPG诱导组KG1-α细胞内EPOR、Jak2、STAT5等由EPOR介导的JAK-STAT通路相关基因的表达均随TSPG浓度增加而降低,其中高浓度具有明显差异(P<0.05);Western blot检测经单独使用TSPG处理了7d的KG1-α细胞,与对照组相比,其EPOR及p-E

作者:李丹阳;夏菁;冯子强;石庆强;游智梅;刘泽洪;陈地龙;李静

来源:第三军医大学学报 2014 年 36卷 21期

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作者:
李丹阳;夏菁;冯子强;石庆强;游智梅;刘泽洪;陈地龙;李静
来源:
第三军医大学学报 2014 年 36卷 21期
标签:
人参总皂苷 KG1-α细胞 促红细胞生成素 细胞凋亡 细胞衰老 total saponins of panax ginseng KG1-α cells apoptosis erythropoietin senescence
目的 探讨人参总皂苷TSPG单独或联合人促红细胞生成素(EPO)对人白血病细胞KG1-α增殖的影响及机制探讨.方法 体外培养KG1-α细胞,选取处于对数生长期的细胞用于实验.空白对照组予以常规培养;人参总皂苷TSPG组分别加入25、50、100、200、400 mg/L TSPG;人参总皂苷+EPO组加入上述等量TSPG,同时加入0.5 U/L EPO,并设置EPO对照组.培养3、7、14 d后用CCK-8法检测TSPG单独或联合EPO对KG1-α细胞增殖的影响;运用Real-time PCR 技术检测EPOR、STAT5、Jak2、AKT等EPO/EPOR通路相关基因的表达.用Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3、P53、P16等蛋白的表达,EPOR蛋白的表达及其活性.结果 人参总皂苷TSPG在体外能明显抑制KG1-α细胞的增殖,100 μmol/L为最适作用浓度,7d为最适作用时间,如果在EPO存在的条件下,其最适浓度则降低到75 mg/L;与对照组相比,在EPO存在的条件下人参总皂苷TSPG诱导可明显使细胞阻滞于G0/G1期,若不使用EPO则TSPG对细胞周期无影响;Real-time PCR检测结果显示TSPG诱导组KG1-α细胞内EPOR、Jak2、STAT5等由EPOR介导的JAK-STAT通路相关基因的表达均随TSPG浓度增加而降低,其中高浓度具有明显差异(P<0.05);Western blot检测经单独使用TSPG处理了7d的KG1-α细胞,与对照组相比,其EPOR及p-E