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目的 构建表达重组的类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅲ型分泌系统结构蛋白BsaL的大肠工程菌,制备高纯度、高质量的重组BsaL蛋白样品,探讨其作为类鼻疽菌检测的候选抗原的可行性.方法 基因工程技术构建表达重组BsaL蛋白的大肠工程菌,通过亲和层析、凝胶过滤层析等纯化方法得到高纯度的BsaL蛋白.包被BsaL蛋白于96孔板,分析其用于检测临床类鼻疽菌株的敏感性和特异性.结果 成功构建了表达重组BsaL蛋白的大肠工程菌,诱导、表达及纯化后得到高纯度(>99%)、高浓度(20 mg/mL)的重组BsaL蛋白.该蛋白在类鼻疽菌检测方面表现出较好的灵敏度(85%)和特异性(89%).结论 成功表达了重组的BsaL蛋白,获得了高纯度的BsaL蛋白样品,在类鼻疽菌的诊断方面展示出较好的应用价值.

作者:方瑶;胡艺;朱攀;任春艳;马腾飞;王昆;毛旭虎

来源:第三军医大学学报 2016 年 38卷 6期

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作者:
方瑶;胡艺;朱攀;任春艳;马腾飞;王昆;毛旭虎
来源:
第三军医大学学报 2016 年 38卷 6期
标签:
类鼻疽伯克霍尔德菌 Ⅲ型分泌系统(TTSS) BsaL ELISA Burkholderia pseudomallei Type Ⅲ secretion system protein BsaL ELISA
目的 构建表达重组的类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅲ型分泌系统结构蛋白BsaL的大肠工程菌,制备高纯度、高质量的重组BsaL蛋白样品,探讨其作为类鼻疽菌检测的候选抗原的可行性.方法 基因工程技术构建表达重组BsaL蛋白的大肠工程菌,通过亲和层析、凝胶过滤层析等纯化方法得到高纯度的BsaL蛋白.包被BsaL蛋白于96孔板,分析其用于检测临床类鼻疽菌株的敏感性和特异性.结果 成功构建了表达重组BsaL蛋白的大肠工程菌,诱导、表达及纯化后得到高纯度(>99%)、高浓度(20 mg/mL)的重组BsaL蛋白.该蛋白在类鼻疽菌检测方面表现出较好的灵敏度(85%)和特异性(89%).结论 成功表达了重组的BsaL蛋白,获得了高纯度的BsaL蛋白样品,在类鼻疽菌的诊断方面展示出较好的应用价值.