目的 构建可以表达人类HLA-DRB1*0803的转基因载体,并在细胞水平验证其表达及抗原递呈功能.方法 提取人WATANABE细胞株(基因型为HLA-DRB1 *0803纯合子)的总RNA,RTPCR扩增DRB1*0803基因片段,与小鼠Eα promoter和兔β-globin基因内含子序列同时导入pBR002-lacz载体.pBR002-HLA-DRB1*0803转基因载体转染小鼠DCS细胞和B细胞系,用Western blot和免疫荧光的方法对HLA-DRB1蛋白进行检测.流式细胞术检测转染小鼠DCS细胞对HBcAg特异性CD4+T细胞的刺激和极化效应.结果 经双酶切和测序验证,成功构建了pBR002-HLA-DRB1*0803转基因载体;转染载体后的小鼠DCS细胞和B细胞系均表达出了大小约为29×103的HLA-DRB1蛋白;免疫荧光结果表明HLA-DRB1蛋白主要表达于细胞质内.转染后的小鼠DCS细胞可将负载的HBcAg递呈给HLA-DRB1 *0803阳性基因型的人CD4+T细胞,产生明显的CD4+T细胞应答.结论 成功构建了HLA-DRB1 *0803转基因载体,该载体可以在细胞水平特异性表达HLA-DRB1蛋白,并具有HLA-DRB1*0803特异性抗原递呈功能.
作者：张旭晖；何韦韦；谭文婷；但芸婕；李辉文；王勇；邓国宏
来源：第三军医大学学报 2016 年 38卷 9期
