目的 探讨lncRNA LSINCT5靶向结合miR-29c促乳头状甲状腺癌(papillary thyroid cancer,PTC)增殖和迁移的作用及机制.方法 高通量转录芯片筛选PTC癌组织和癌旁组织差异表达lncRNAs.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测32例来源于本院的PTC配对癌组织和癌旁组织样本(其中男性18例,女性14例,平均年龄57岁)和PTC细胞系中LSINCT5的表达水平.PTC细胞株TPC-1和KAT-5中转染siNC、siLSINCT5-1、siLSINCT5-2后,CCK-8和Transwell迁移实验测定转染各组的细胞增殖和转移水平.采用双荧光素酶报告基因实验验证LSINCT5与miR-29c的靶向结合.TPC-1细胞中转染Control (空质粒组)、LSINCT5、LSINCT5-Mut以及共转染LSINCT5和miR-29c后,qRT-PCR 和Western blot检测ITGB1和E-cadherin表达水平.结果 与配对的癌旁组织相比,LSINCT5在癌组织中表达显著升高(P < 0. 05).LSINCT5在PTC细胞系中表达均高于人正常甲状腺细胞HT-ori3,差异有统计学意义(P < 0. 05).与转染siNC相比,PTC细胞株TPC-1和KAT-5在转染siLSINCT5-1、siLSINCT5-2后,TPC-1和KAT-5细胞的增殖和迁移能力均显著降低(P < 0. 05).双荧光素酶报告基因和RIP证实LSINCT5能够与miR-29c特异性结合.与转染LSINCT5组相比,共转染LSINCT5和miR-29c组中TPC-1细胞增殖和迁移能力均显著降
作者:匡剑韧;魏平
来源:第三军医大学学报 2018 年 20期