目的 研究miR-1322对低氧诱导人肺动脉平滑肌细胞(human pulmonary artery smooth muscle cells,HPASMCs)增殖的调控作用并探讨其机制.方法 HPASMCs在1％ O2低氧中分别暴露0、6、12、24、48 h,利用RT-qPCR检测各个时间点miR-1322的表达,Western blot检测骨形成蛋白受体2(bone morphogenetic protein receptor 2,BMPR2)、p-smad1/5/9、p21的蛋白表达,CCK-8检测细胞增殖.将miR-1322抑制物(inhibitor)和阴性对照(negative control,NC)转染HPASMCs细胞24 h后再行低氧处理48 h,采用CCK-8检测12、24、48 h时细胞的增殖水平.利用双荧光素酶报告基因检测分析miR-1322是否绑定BMPR2 3'非编码区(untranslated regions,UTR).采用Western blot检测miR-1322对BMPR2蛋白的调控作用.转染BMPR2过表达质粒24 h后,再进行低氧处理48 h,采用CCK-8检测12、24、48 h时细胞的增殖水平,Western blot检测p-smad1/5/9和p21的蛋白表达.结果 HPASMCs低氧暴露12、24 h和48 h组miR-1322的表达均显著高于0h组(P＜0.05).miR-1322 inhibitor组miR-1322表达显著低于NC组(P＜0.05).miR-1322 inhibitor/低氧组在24、48 h时细胞增殖水平显著低于相同时间点的低氧组(P＜0.05).荧光素酶报告基因结果显示BMPR2是miR-1322的靶点.上调miR-1322的表达

作者：周咏梅；王斌；高瞻；张明周；李瑾；魏征华；游节根；贺斌峰

来源：第三军医大学学报 2018 年 40卷 21期