目的 探讨人下颌下腺细胞(human submandibular gland,HSG)中,甲基化CpG结合域蛋白2 (menthyl-CpG-binding domain protein 2,MBD2)是否影响水通道蛋白调控-5(aquaporin 5,AQP5)的表达,为干燥综合征(Sj(o)gren's syndrome,SS)的治疗提供新的思路.方法 体外培养HSG细胞,通过AQP5的启动子质粒与MBD2-siRNA或MBD2过表达质粒共转染HSG细胞,利用双荧光素酶报告基因系统检测AQP5启动子的活性;再用MBD2-siRNA或MBD2过表达质粒转染HSG细胞,利用RT-PCR及Western blot技术检测MBD2和AQP5在mRNA水平及蛋白水平上表达的改变.结果 ①MBD2-siRNA转染HSG细胞后,AQP5 pro活性分别上调49.30%和58.35%(P<0.05),AQP5在mRNA水平上表达上调35.40%和471.19%(P<0.05),蛋白水平上调56.16%和82.78% (P<0.05).结果表明:MBD2-siRNA转染HSG细胞后,AQP5启动子活性增加,AQP5表达上调.②MBD2过表达质粒转染HSG细胞后,AQP5 pro活性分别下调25.36%、30.52%及34.78% (P<0.05),AQP5在mRNA水平上表达下调8.06%和87.60%(过表达质粒1μg组与对照组相比无统计学意义,P>0.05;过表达质粒2μg组与对照组相比差异有统计学意义P<0.05),在蛋白水平上表达下调44.50%和53.18%(P<0.05).实验结果表明:MBD2转染ASG细胞后,AQP5启动子活性
作者:陈中林;聂敏海;贾颖;叶艳艳;邓舒婷;黄葳;刘旭倩
来源:第三军医大学学报 2019 年 41卷 10期