目的 探讨黄芪注射液对缺氧复氧(anoxia-reoxygenation,AR)所致的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)损伤的保护作用及其作用机制.方法 缺氧条件下(95%N2,5%CO2)培养第10代HUVECs(AR组)6h,随后在正常培养条件下(20%O2,5%CO2)继续复氧培养细胞2h,并在期间同时应用5、10、20 mg/mL黄芪注射液进行干预,以正常条件下培养的第10代HUVECs作为对照组.通过MTT法测定细胞活性,光学显微镜下观察细胞形态以及细胞SA-β-gal染色情况,ELISA检测细胞超氧化物歧化酶(superoxide dismutases,SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性,RT-PCR检测细胞KNDC1 mRNA转录水平,Western blot检测细胞中p53、p-p53、p21和KNDC1蛋白表达.结果 黄芪注射液可改善AR所致的细胞增殖抑制、细胞SOD、GSH-Px活性降低及细胞损伤,并在所研究的剂量范围内具有明显的剂量-效应关系(P<0.05).AR可导致KNDC1 mRNA及蛋白表达明显升高,同时上调其下游p53/p21通路蛋白的表达(P<0.05).黄芪注射液呈浓度依赖性降低AR导致的KNDC1 mRNA及KNDC1、p53、p-p53和p21蛋白表达的升高(P<0.05).结论 黄芪注射液通过抑制KNDC 1/p53通路的过度激活,提高细胞的活力及抗氧化能力,改善AR所致的HUVECs损伤.
作者:姚赫;陈冰;魏洁;胡刚;林雅军
来源:第三军医大学学报 2020 年 42卷 20期