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目的 探讨低强度脉冲聚焦超声(focused low-intensity pulsed ultrasound,FLIPUS)对软骨细胞线粒体自噬活化的影响.方法 提取C57BL/6J乳鼠膝关节原代软骨细胞进行体外实验,IL-1β处理细胞模拟骨关节炎样软骨细胞损伤并进行验证.细胞分为对照组、IL-1β组和IL-1β+FLIPUS组.RT-PCR检测各组Col2α1 和MMP13 mRNA 表达;Western blot 检测各组Col2α1、MMP13、LC3B-Ⅱ、TOM20、TIM23、PGAM5、FUNDC1及p-FUNDC1(p-ser13)蛋白表达.结果 成功提取原代软骨细胞并模拟骨关节炎样软骨细胞损伤.与对照组比较,IL-1β组Col2α1 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01),MMP13 mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.01);与IL-1β组相比,IL-1β+FLIPUS组Col2α1表达明显上升(P<0.05),MMP13表达明显下降(P<0.01).与对照组相比,IL-1β组LC3B-Ⅱ蛋白表达显著降低(P<0.05);与IL-1β组相比,IL-1β+FLIPUS组LC3B-Ⅱ、PGAM5蛋白表达显著上升(P<0.01),TOM20、TIM23、p-ser13蛋白表达则明显下降(P<0.05).结论 FLIPUS可能通过上调软骨细胞PGAM5蛋白表达,使FUNDC1第13位丝氨酸去磷酸化,活化线粒体自噬.

作者:叶海霞;虞乐华;贾朗

来源:第三军医大学学报 2021 年 43卷 5期

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作者:
叶海霞;虞乐华;贾朗
来源:
第三军医大学学报 2021 年 43卷 5期
标签:
低强度脉冲聚焦超声 膝骨关节炎 线粒体自噬 PGAM5 FUNDC1
目的 探讨低强度脉冲聚焦超声(focused low-intensity pulsed ultrasound,FLIPUS)对软骨细胞线粒体自噬活化的影响.方法 提取C57BL/6J乳鼠膝关节原代软骨细胞进行体外实验,IL-1β处理细胞模拟骨关节炎样软骨细胞损伤并进行验证.细胞分为对照组、IL-1β组和IL-1β+FLIPUS组.RT-PCR检测各组Col2α1 和MMP13 mRNA 表达;Western blot 检测各组Col2α1、MMP13、LC3B-Ⅱ、TOM20、TIM23、PGAM5、FUNDC1及p-FUNDC1(p-ser13)蛋白表达.结果 成功提取原代软骨细胞并模拟骨关节炎样软骨细胞损伤.与对照组比较,IL-1β组Col2α1 mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01),MMP13 mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.01);与IL-1β组相比,IL-1β+FLIPUS组Col2α1表达明显上升(P<0.05),MMP13表达明显下降(P<0.01).与对照组相比,IL-1β组LC3B-Ⅱ蛋白表达显著降低(P<0.05);与IL-1β组相比,IL-1β+FLIPUS组LC3B-Ⅱ、PGAM5蛋白表达显著上升(P<0.01),TOM20、TIM23、p-ser13蛋白表达则明显下降(P<0.05).结论 FLIPUS可能通过上调软骨细胞PGAM5蛋白表达,使FUNDC1第13位丝氨酸去磷酸化,活化线粒体自噬.