目的 观察褪黑素(melatonin,Mel)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖功能的影响并探讨其可能的分子机制.方法 ①选用不同浓度(0、10、20、50、100 μg/mL)的ox-LDL诱导VSMCs 48 h后检测细胞增殖功能,观察各浓度ox-LDL对VSMCs功能的影响.②选择最佳浓度(50 μg/mL)的ox-LDL诱导VSMCs 0、6、12、24、48 h后检测细胞增殖功能,观察各时间点ox-LDL对VSMCs功能的影响.③50 μg/mL的ox-LDL诱导VSMCs 24 h后,再用1、1×103、1×105、1×106 nmol/L的Mel处理VSMCs 48 h,观察Mel作用不同时间对VSMCs增殖功能的影响.(④使用ox-LDL联合Me1处理VSMCs.实验分4组:空白对照组(VSMCs正常培养不进行任何处理),Mel组(1×105 nmol/L Mel处理VSMCs 48 h),ox-LDL组(50 μg/mL ox-LDL诱导VSMCs 24 h),ox-LDL+ Mel组(使用50 μg/mL的ox-LDL诱导VSMCs 24 h后,接着使用1×105 nmol/L的Mel处理VSMCs 48 h).采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期,免疫荧光染色和Western blot检测增殖标记物(PCNA)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞周期素A(Cyclin A)、细胞周期抑制蛋白p21以及细胞外调节蛋白激酶1/2 (ERK1/2)信号通路相关蛋白表达.结果 与空白对照组比较,50 μg/mL
作者:唐杨;刘川;康华利;晋军
来源:第三军医大学学报 2021 年 43卷 17期