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目的 研究微丝解聚在低强度脉冲超声(low intensity pulsed ultrasound,LIPUS)促进骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化时的作用.方法 培养小鼠BMSCs,随机分为4组:空白对照组;LIPUS组;LIPUS+DMSO组;LIPUS+CytoD(细胞松弛素D,Cytochalasin D)组.碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测ALP活性.免疫荧光染色观察RUNX2的表达和细胞定位.Western blot检测成骨分化相关基因Ⅰ型胶原(Collagen1)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、Runt 相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)的蛋白表达变化以及细胞中丝状肌动蛋白(filamentous actin,F-actin)与球状/单体肌动蛋白(globular/monomeric actin,G-actin)的含量.通过激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化及微丝骨架结构变化.结果 与空白对照组相比,LIPUS辐照能显著增加ALP活性,促成骨相关基因Collagen1(P<0.01)、OPN(P<0.05)、RUNX2(P<0.01)的蛋白表达量升高,其中RUNX2表达量升高约1.5倍(P<0.01).荧光染色显示LIPUS处理后RUNX2在细胞核内表达明显增加,细胞略缩小,同时可见细胞质内点状G-actin分布,Western blot实验分析F-actin/G-actin的比值发现LIPUS组明显小于对照组(P<0.05).此外,与LIPUS+DMSO组相比,L

作者:杨丽;姚欢;朱慧;何依蔓;杨珂;王冬

来源:陆军军医大学学报 2022 年 44卷 9期

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作者:
杨丽;姚欢;朱慧;何依蔓;杨珂;王冬
来源:
陆军军医大学学报 2022 年 44卷 9期
标签:
微丝解聚 低强度脉冲超声 骨髓间充质干细胞 成骨分化
目的 研究微丝解聚在低强度脉冲超声(low intensity pulsed ultrasound,LIPUS)促进骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化时的作用.方法 培养小鼠BMSCs,随机分为4组:空白对照组;LIPUS组;LIPUS+DMSO组;LIPUS+CytoD(细胞松弛素D,Cytochalasin D)组.碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测ALP活性.免疫荧光染色观察RUNX2的表达和细胞定位.Western blot检测成骨分化相关基因Ⅰ型胶原(Collagen1)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、Runt 相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)的蛋白表达变化以及细胞中丝状肌动蛋白(filamentous actin,F-actin)与球状/单体肌动蛋白(globular/monomeric actin,G-actin)的含量.通过激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化及微丝骨架结构变化.结果 与空白对照组相比,LIPUS辐照能显著增加ALP活性,促成骨相关基因Collagen1(P<0.01)、OPN(P<0.05)、RUNX2(P<0.01)的蛋白表达量升高,其中RUNX2表达量升高约1.5倍(P<0.01).荧光染色显示LIPUS处理后RUNX2在细胞核内表达明显增加,细胞略缩小,同时可见细胞质内点状G-actin分布,Western blot实验分析F-actin/G-actin的比值发现LIPUS组明显小于对照组(P<0.05).此外,与LIPUS+DMSO组相比,L