目的 探讨组织蛋白酶K(cathepsin K,CatK)在酒精性心肌病(alcoholic cardiomyopathy,ACM)小鼠心功能不全中的作用及其损伤机制.方法 48只8周龄C57BL/6J雄性小鼠按随机数字表法分为对照组(n=12,等热量麦芽糖糊精对照液体饲料喂养)和模型组(n=36,4％乙醇Lieber-DeCarli液体饲料喂养).8周后,以超声心动图心脏收缩功能下降的模型组小鼠为ACM,按随机数字表法分为:ACM组、sh-NC组、sh-CatK组,每组12只.分别向sh-NC组和sh-CatK组小鼠鼠尾静脉注射1×109 vg(100 μL)Scramble-shRNA和CatK-shRNA的重组腺病毒.在第12周末,采用M型超声心动图测量心功能.免疫组织化学检测CatK和Nox4蛋白表达.体外实验以H9c2心肌细胞为研究对象,评价CatK-shRNA介导的CatK沉默对乙醇诱导的心肌细胞损伤的影响.采用蛋白质印迹法分析AMPK/Nox4信号通路蛋白表达;采用流式细胞仪分析H9c2细胞凋亡情况.应用荧光染料二氢乙胺测定小鼠心肌组织和体外培养的H9c2细胞的活性氧水平.结果 ACM组心肌细胞表面积,心肌纤维化面积,心肌组织中CatK、Nox4蛋白表达和超氧化物的产生均较对照组显著增加(P＜0.05).与ACM组相比,sh-CatK组心肌细胞表面积,心肌纤维化面积,心肌组织中CatK、Nox4蛋白表达和超氧化物的产生均显著降低(P＜0.05).体外结果显示,随着暴

作者：唐一锋；刘志江；许官学；赵然尊；陈文明；石蓓

来源：陆军军医大学学报 2022 年 44卷 13期