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目的 探讨人源性激肽释放酶结合蛋白(kallistatin,KS)对椎间盘髓核细胞的作用及可能机制.方法 在正常和退变髓核中检测KS的表达;过氧化氢/KS处理细胞后分为Control、H2O2、KS及H202+KS 4组,检测各组细胞凋亡和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的变化;利用沉默信息调节因子 2 相关酶 Ⅰ(silencing information regulator 2 related enzyme Ⅰ,SIRT1)小干扰 RNA(siRNA-SIRT1)/KS 处理细胞后分为 Control、H2O2、KS+H2O2,KS+H2O2+siRNA-NC 及 KS+H2O2+siRNA-SIRT1 5 组,检测各组髓核细胞凋亡及ECM的表达.结果 退变椎间盘髓核中KS的mRNA和蛋白的表达水平明显低于正常髓核(P<0.05);相比于H2O2组,KS组及H2O2+KS组髓核细胞凋亡率明显降低(P<0.05),凋亡基因Caspase3、Caspase9和Bax mRNA及蛋白表达量明显降低(P<0.05),抗凋亡基因Bcl2表达量明显增加(P<0.05);GAG含量、Collagen Ⅱ和Aggrecan表达显著提高(P<0.05).当siRNA-SIRT1敲降髓核细胞 SIRT1 表达后,相比于 Control、KS+H2O2 和 KS+H2O2+siRNA-NC 组,KS+H2O2+siRNA-SIRT1 组凋亡率显著增加,GAG含量、Collagen Ⅱ和Aggrecan蛋白表达也显著降低(P<0.05).结论 KS可通过诱导SIRT1表达抑制H2O2诱导的人髓核细胞凋亡和ECM降解.

作者:陆恩辉;李庆姝;谭云

来源:陆军军医大学学报 2022 年 44卷 23期

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作者:
陆恩辉;李庆姝;谭云
来源:
陆军军医大学学报 2022 年 44卷 23期
标签:
人源性激肽释放酶结合蛋白 沉默信息调节因子2相关酶Ⅰ 凋亡 细胞外基质 椎间盘退变
目的 探讨人源性激肽释放酶结合蛋白(kallistatin,KS)对椎间盘髓核细胞的作用及可能机制.方法 在正常和退变髓核中检测KS的表达;过氧化氢/KS处理细胞后分为Control、H2O2、KS及H202+KS 4组,检测各组细胞凋亡和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的变化;利用沉默信息调节因子 2 相关酶 Ⅰ(silencing information regulator 2 related enzyme Ⅰ,SIRT1)小干扰 RNA(siRNA-SIRT1)/KS 处理细胞后分为 Control、H2O2、KS+H2O2,KS+H2O2+siRNA-NC 及 KS+H2O2+siRNA-SIRT1 5 组,检测各组髓核细胞凋亡及ECM的表达.结果 退变椎间盘髓核中KS的mRNA和蛋白的表达水平明显低于正常髓核(P<0.05);相比于H2O2组,KS组及H2O2+KS组髓核细胞凋亡率明显降低(P<0.05),凋亡基因Caspase3、Caspase9和Bax mRNA及蛋白表达量明显降低(P<0.05),抗凋亡基因Bcl2表达量明显增加(P<0.05);GAG含量、Collagen Ⅱ和Aggrecan表达显著提高(P<0.05).当siRNA-SIRT1敲降髓核细胞 SIRT1 表达后,相比于 Control、KS+H2O2 和 KS+H2O2+siRNA-NC 组,KS+H2O2+siRNA-SIRT1 组凋亡率显著增加,GAG含量、Collagen Ⅱ和Aggrecan蛋白表达也显著降低(P<0.05).结论 KS可通过诱导SIRT1表达抑制H2O2诱导的人髓核细胞凋亡和ECM降解.