目的筛选类风湿性关节炎(RA)滑膜细胞中的高表达基因,以探讨RA滑膜细胞发生肿瘤样增殖和侵蚀软骨的分子机理. 方法以骨性关节炎(osteoarthritis, OA) 滑膜细胞作对照,采用差示PCR (differentially display PCR)方法,克隆RA滑膜细胞中高表达的cDNAs片段,经反向点杂交排除假阳性克隆后,将阳性克隆进行基因序列分析. 结果共回收76个差异条带,得到42个有插段的克隆,经反向点杂交后得到22个阳性克隆,对其中19个克隆进行基因序列分析表明,最长片段为501 bp长,最短片段为145 bp长,大部分在300 bp. 有13个克隆为已知基因,其中包括组织蛋白酶,其它6个克隆为未知序列,这些未知序列中除一个序列外都为基因的非编码区. 结论差示PCR方法在筛选差异表达基因方面存在着很大的局限性;组织蛋白酶B可能与RA滑膜细胞的软骨侵蚀性有关.
作者:王吉村;药立波;吕厚山;刘新平;赵锦荣;邓艳春;孙铁铮;聂晓燕
来源:第四军医大学学报 2001 年 22卷 4期