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Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统是一种高效真核表达系统.采用重组DNA技术构建棉蚜乙酰胆碱酯酶1(AChE1)表达质粒,应用该系统在昆虫Sf9细胞系中成功表达了棉蚜的AChE1.表达的AChE以可溶性形式释放于细胞培养液中,对其自然底物类似物ATChI的Km值为(144.5±28.6)μm;对抗蚜威、唑蚜威、氧化乐果和灭赐松等4种杀虫剂的敏感性指数(Ki值)分别为513、1 883、5和23(mM·min)-1,与文献报道的测定结果基本一致.昆虫细胞被重组病毒感染后第2~3天所得产物的活性最高;该产物在-20℃保存90 d后活性没有明显下降,4℃保存60 d后下降40

作者:董双林;韩召军;Martin S WILLIAMSON

来源:动物学研究 2006 年 27卷 1期

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作者:
董双林;韩召军;Martin S WILLIAMSON
来源:
动物学研究 2006 年 27卷 1期
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Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统 棉蚜 乙酰胆碱酯酶 Sf9细胞系
Bac-to-Bac昆虫杆状病毒表达系统是一种高效真核表达系统.采用重组DNA技术构建棉蚜乙酰胆碱酯酶1(AChE1)表达质粒,应用该系统在昆虫Sf9细胞系中成功表达了棉蚜的AChE1.表达的AChE以可溶性形式释放于细胞培养液中,对其自然底物类似物ATChI的Km值为(144.5±28.6)μm;对抗蚜威、唑蚜威、氧化乐果和灭赐松等4种杀虫剂的敏感性指数(Ki值)分别为513、1 883、5和23(mM·min)-1,与文献报道的测定结果基本一致.昆虫细胞被重组病毒感染后第2~3天所得产物的活性最高;该产物在-20℃保存90 d后活性没有明显下降,4℃保存60 d后下降40