凡纳滨对虾DNase Ⅰ基因的克隆及原核表达-临床诊疗知识库

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作者：

兰旺仁；张子平；邹志华；王国栋；王艺磊

来源：

动物学杂志 2010 年 45卷 1期

标签：

DNase DNase Ⅰ RACE 原核表达凡纳滨对虾 Dnase Dnase Ⅰ RACE Prokaryotic expression Litopenaeus vannamei

利用RT-PCR和RACE技术,从凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肝胰腺中克隆了DNase DNase Ⅰ基因的全长cDNA序列.该序列全长11614 bp,包含1209 bp的开放阅读框,编码一个含403个氨基酸的蛋白;5'非翻译区为116 bp,3'非翻译区为289 bp.实时定量PCR分析结果表明,DNase DNase Ⅰ基因在肝胰腺的表达量是其他器官表达量的16～162倍,表明凡纳滨对虾DNase DNase Ⅰ基因属于胰腺型表达.本研究还利用酶切重组构建原核表达载体,并在大肠杆菌(Escherichia coli)中成功表达出了有活性的重组DNase DNase Ⅰ蛋白.

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