为探究双须骨舌鱼(Osteoglossum bicirrhosum)卵黄蛋白原vtg基因的结构和表达特征,本研究运用RACE技术克隆双须骨舌鱼vtg全长cDNA序列.序列分析发现,双须骨舌鱼vtg的cDNA全长为5 325 bp,开放阅读框(ORF)为5 121 bp,其5 ′和3′非编码区(UTR)分别为46 bp和159 bp,共编码1 706个氨基酸,预测蛋白质分子量约为186.79 ku.同源性分析发现,双须骨舌鱼与同科的美丽仆骨舌鱼(Scleropages formosus)相似度达到84.78％,与鲤形目、鲈形目、鲱形目、鲽形目鱼类的相似度均高于50％.系统进化树分析结果显示,本文获得的双须骨舌鱼vtg基因与骨舌鱼目聚为一类,与鳗鲡目硬骨鱼类亲缘关系较近,与双须骨舌鱼进化地位相符.荧光定量PCR检测结果表明,在雌雄鱼性腺和肝中vtg均有表达,且在雌鱼肝中的相对表达量显著高雄鱼(P＜0.05),卵巢和精巢表达量无显著差异(P＞0.05);在雌雄鱼鳃、脾、肾、肌肉、心、头肾、脑等7个组织中均极微量表达,且无显著差异(P＞ 0.05).在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期卵巢中vtg相对表达量依次增加,Ⅳ期显著高于Ⅱ和Ⅲ期(P＜0.05),也显著高于精巢Ⅳ期(P＜0.05);在雌鱼肝组织中呈先增后减趋势,且Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期之间无显著差异(P＞0.05),但每个时期都显著高于雄性(P＜ 0.05).成功构建了原核表达载体pEASY-BluntE2-vtg,并转入Tra
作者：潘贤辉；刘奕；周康奇；胡隐昌；郑曙明；宋红梅；牟希东；杨叶欣
来源：动物学杂志 2018 年 53卷 4期
