为建立一种快速诊断由猪链球菌(SS)、猪胸膜肺炎放线杆菌(App)、猪多杀性巴氏杆菌(Pm)、副猪嗜血杆菌(Hps)、猪支气管败血波氏杆菌(Bb)和猪肺炎支原体(Mhp)单独或混合感染引起的猪呼吸道疾病的检测方法,基于上述6种病原菌对应的gdh(SS)、apx Ⅳ A(App)、KMT1(Pm)、16S rRNA(Hps)、fla(Bb)和p36 ldh(Mhp)基因设计特异性引物,通过优化各反应条件建立了能同时检测SS、App、Pm、Hps、Bb和Mhp的多重PCR方法.结果显示,该方法特异性强,仅对SS、App、Pm、Hps、Bb和Mhp有特异性扩增,对大肠埃希氏菌、奇异变形杆菌、停乳链球菌和金黄色葡萄球菌等其他病原菌的扩增结果均为阴性;敏感性较高,对6种病原菌DNA的最低检出限分别为SS 8.66× 102拷贝/μL、App 1.05 × 104拷贝/μL、Pm 8.61×102 拷贝/μL、Hps 9.01×102 拷贝/μL、Bb 7.54× 102 拷贝/μL、Mhp 3.86 × 103 拷贝/μL.利用该多重PCR和各单项PCR分别检测贵州省9个市(州)部分猪场的469份临床样品,结果显示,多重PCR阳性检出率为 App 0.85％(4/469)、Pm 15.35％(72/469)、SS 59.49％(279/469)、Hps 52.67％(247/469)、Mhp 6.40％(30/469)、Bb 5.12％(24/469).混合感染主要以SS和Hps为主,阳性检出率为30.92％(145/469),其次是Pm、SS和Hps混合感染,阳性检出率为

作者：吴艳；黎娜铭；张宇鑫；张伟；陈穗莲；黄云；田永宽；曾智勇；吴学祥；王彬

来源：动物医学进展 2023 年 44卷 12期